ASP2人胚胎肾细胞转化细胞
ASP2人胚胎肾细胞转化细胞核心产品为构建成功的稳定转化细胞株,可提供不同基因修饰类型(ASP2过表达、ASP2干扰)的细胞系,配套提供细胞培养说明书、细胞冻存液、复苏液及质量检测报告(含细胞纯度、ASP2基因表达效率、支原体检测等),同时提供细胞培养技术支持及定制化基因修饰服务。该细胞以人胚胎肾细胞为亲本,采用慢病毒介导转染等成熟基因编辑技术,将ASP2基因定向导入亲本细胞,经嘌呤霉素抗性筛选、Western Blot、Real-time PCR等方法验证,确保ASP2基因稳定表达(过表达细胞系ASP2蛋白表达水平显著升高,干扰细胞系表达水平显著下调),细胞纯度≥98%,无支原体、细菌、真菌污染。该细胞适配常规细胞培养条件,可稳定传代20代以上,生物学特性稳定,保留其固有生理功能及ASP2基因调控特性,广泛应用于急性肾损伤、肾细胞癌等肾脏疾病发病机制研究、ASP2基因对细胞凋亡与自噬的调控研究、肿瘤转移相关机制研究及相关靶向药物筛选等科研场景,为肾脏病学、分子生物学、肿瘤学等相关领域的科研探索、药物研发提供核心细胞模型,适配科研院所、生物医药企业、高校实验室及各级医院肾内科、肿瘤科科研部门。
构建原理
该细胞的构建核心基于基因编辑技术,结合人胚胎肾细胞的生物学特性及ASP2基因的功能特点,实现ASP2基因的精准导入与稳定表达,具体核心原理分为两种常见类型,适配不同科研需求:一是ASP2过表达细胞构建原理,将ASP2基因片段克隆至慢病毒表达载体,与辅助质粒(psPAX2、pMD2.G等)共转染293T细胞,收集病毒上清后感染人胚胎肾亲本细胞,通过嘌呤霉素抗性筛选获得稳定过表达ASP2基因的转化细胞株,用于研究ASP2基因的促凋亡、抑癌及调控自噬的功能,探究其在肾脏疾病中的作用机制;二是ASP2干扰细胞构建原理,构建靶向ASP2基因的shRNA慢病毒表达质粒,转染人胚胎肾亲本细胞后筛选稳定细胞株,通过Western Blot和Real-time PCR检测验证ASP2基因表达水平显著下调,用于研究ASP2基因沉默后对肾细胞增殖、凋亡、自噬及肿瘤转移能力的影响。此外,所有构建的转化细胞系均需经过支原体、细菌等污染检测及细胞活力、传代能力验证,确保细胞系的稳定性和可靠性,为后续科研实验提供优质细胞模型,同时可通过优化培养体系,模拟体内肾脏微环境,提升细胞体外培养的稳定性。
产品特点
该细胞以“纯度高、稳定性好、基因表达精准、适配性广"为核心,贴合肾脏疾病、肿瘤相关研究的实际科研需求,核心特点突出,匹配科研实验对细胞模型的核心诉求。一是基因修饰精准高效,采用慢病毒转染等成熟基因编辑技术,经多轮验证确保ASP2基因稳定表达或干扰,无明显脱靶效应,能精准模拟肾脏疾病、肿瘤中ASP2基因异常调控的病理状态,助力相关机制研究;二是细胞纯度高、无污染,细胞纯度≥98%,经严格检测无支原体、细菌、真菌及杂细胞污染,确保实验结果的准确性,避免杂细胞及污染对实验的干扰;三是生物学特性稳定,细胞生长状态良好,可稳定传代20代以上,传代过程中ASP2基因表达特性不丢失,细胞增殖、凋亡、自噬等生物学行为稳定,符合科研实验对数据可重复性的核心要求;四是功能关联性强,保留人胚胎肾细胞的固有特性,同时具备ASP2基因调控相关功能,可用于研究ASP2对细胞凋亡、自噬的调控机制,以及与急性肾损伤、肾细胞癌、肿瘤转移的关联,适配多领域科研需求;五是适配性强,可适配体外常规细胞培养、MTT增殖实验、平板克隆形成实验、Western blotting检测、免疫荧光染色、流式细胞术等多种实验场景,同时可用于裸鼠异种移植体内实验,助力体内外协同研究;六是操作便捷,提供完整的细胞复苏、培养、冻存说明书,细胞复苏成活率高(≥90%),无需复杂实验设备,常规细胞培养条件即可满足生长需求,适配各类实验室操作,同时提供基因表达验证、细胞培养等专属技术指导。
适用实验场景
该细胞专为肾脏疾病、肿瘤相关科研实验设计,适配多种体外及体内实验场景,核心应用包括:一是肾脏疾病发病机制研究,探究该细胞中ASP2基因表达异常与急性肾损伤、肾细胞癌等疾病的关联,明确ASP2通过调控自噬、细胞凋亡影响肾脏疾病发生发展的分子机制,为疾病早期预防和诊断提供理论依据;二是ASP2基因功能研究,通过该细胞开展ASP2基因过表达或沉默实验,探究其对细胞凋亡、自噬的调控作用,以及与AMPK-mTOR、Atg5-Atg12等相关信号通路的关联,明确其在细胞生理、病理过程中的核心作用;三是肿瘤相关机制研究,利用该细胞探究ASP2基因对肿瘤转移的调控作用,分析其与E-钙粘蛋白、β-连环蛋白及VEGF等相关蛋白的关联,为肿瘤靶向治疗研究提供支撑;四是药物筛选与药效评估,将该细胞用于针对ASP2基因及相关信号通路的靶向药物筛选,通过MTT实验、流式细胞术等,评估药物对该细胞增殖、凋亡、自噬的影响,为肾脏疾病、肿瘤相关药物研发提供可靠的筛选模型;五是分子机制验证实验,可用于Western blotting、Real-time PCR、免疫荧光染色等实验,验证ASP2基因相关信号通路的调控机制,为相关疾病发病机制研究提供分子层面的数据支撑;六是细胞衰老相关研究,探究ASP2基因与细胞衰老的关联,为细胞衰老相关疾病的研究提供细胞模型支撑。该细胞适配科研院所、生物医药企业、高校实验室及各级医院肾内科、肿瘤科科研部门,助力相关科研实验的顺利开展。
备注:(具体细胞培养及实验操作方法请参考产品说明书)
储存与注意事项
储存方面,该细胞冻存状态下需置于-80℃超低温冰箱或液氮中保存,有效期为12个月,冻存时需使用含5-10%DMSO的配套冻存液,采用梯度降温法冻存(-1~-2℃/min降温至-25℃以下,再以-5~-10℃/min降温至-100℃后浸入液氮),避免细胞损伤;复苏时需快速解冻(37℃水浴1-2分钟),解冻后立即用70%酒精消毒冻存管,避免进水污染,复苏后需立即接种至培养瓶,置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养,复苏后24小时内避免更换培养基,确保细胞适应环境;常规培养状态下,细胞需置于37℃、5% CO₂培养箱中,使用含10%胎牛血清的DMEM或RPMI 1640培养基培养,定期更换培养基(每2-3天一次),确保细胞正常生长。注意事项包括:产品仅供科研使用,不用于临床治疗诊断;细胞复苏时需快速解冻,避免反复冻融,解冻后及时接种,防止细胞活力下降,冻存管取出时需注意防护,避免冻伤;培养过程中需严格遵循无菌操作原则,禁止共用培养耗材,避免细胞污染,若发生污染切勿进行半量换液;细胞传代时需控制消化时间,避免过度消化导致细胞损伤,传代比例建议为1:3-1:5,确保细胞生长密度适宜;检测过程中(如Western blotting、Real-time PCR),需严格遵循实验操作规范,确保ASP2基因表达及相关分子检测结果准确;过期细胞及污染细胞严禁使用,详细安全信息请参照产品SDS文件;运输过程中需采用干冰运输,避免高温、剧烈震荡,确保细胞活力,运输后需及时复苏或转移至对应储存环境。
订购信息
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以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。