EBV-转化人淋巴细胞株
EBV-转化人淋巴细胞株,是通过EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)特异性感染人外周血B淋巴细胞,诱导其发生永生化转化形成的淋巴母细胞系,是科研领域常用的标准化实验材料。该细胞系核心优势在于可在体外长期稳定培养,同时完整保留人B淋巴细胞的部分免疫表型与生物学功能,携带EBV基因组并可长期潜伏表达相关抗原,生物安全等级为BSL-2。该细胞系经严格质量鉴定,无细菌、真菌、支原体及无关病毒污染,细胞活力高、代次低,生物学特性稳定,可广泛应用于人类遗传学、免疫学、病毒学、肿瘤学等多个科研领域,为相关实验研究提供可靠的体外细胞模型支撑,适配科研院所、生物医药企业及各级医院科研部门的实验需求。
检测原理
本产品的核心检测是EBV感染有效性验证、细胞纯度及活性鉴定,结合细胞生物学与分子生物学检测方法,确保细胞系的真实性与稳定性,具体原理如下:一是EBV感染验证,采用免疫荧光法或Western Blot法,检测细胞内EBV相关抗原(如EBNA、VCA)的表达,或通过PCR技术检测EBV基因组特异性片段,确认细胞已成功被EBV感染并实现永生化;二是细胞活性检测,采用台盼蓝染色法,利用活细胞细胞膜完整、不被台盼蓝染色,死细胞细胞膜破损、被染成蓝色的特性,计数活细胞比例,评估细胞活性;三是细胞纯度检测,通过流式细胞术检测细胞表面CD21(EBV受体)、CD19(B淋巴细胞特异性标志物)的表达,排除杂细胞污染,确保细胞系纯度;四是污染检测,采用微生物培养法检测细菌、真菌污染,PCR法检测支原体污染,确保细胞无外源污染,保障实验数据的可靠性。
产品特点
本产品针对科研实验需求优化制备,兼具稳定性、特异性与实用性,核心特点如下:1. 永生化特性突出,可在体外长期稳定培养,倍增时间约2-3天,无需频繁分离原代人外周血B淋巴细胞,大幅降低实验人力与时间成本,同时避免原代细胞来源有限的问题;2. 生物学特性稳定,经多代传代后仍能保留人B淋巴细胞部分免疫功能及EBV潜伏感染状态,染色体核型保持人类正常二倍体,无明显变异,保障实验数据的一致性;3. 特异性强,仅由EBV感染人外周血B淋巴细胞转化形成,可特异性表达EBV相关抗原,部分细胞系可释放高滴度EBV,适配EBV相关专项研究及人EBV感染机制研究;4. 细胞活力高,产品出厂前经严格筛选,细胞活力≥95%,代次控制在5代以内,复苏后存活率高,可快速适应培养环境;5. 无外源污染,经严格QC检测,确保无细菌、真菌、支原体及无关病毒污染,提供完整检测报告;6. 适配性广,可兼容RPMI 1640、IMDM等多种培养基,支持悬浮培养,部分细胞可适应缺氧培养条件,适配免疫、病毒、遗传等多种科研实验场景;7. 实用性强,可直接用于实验,无需额外进行转化操作,厂家提供全程技术指导,降低实验门槛。
适用样本类型
本产品为成品,适配各类科研实验场景,可直接用于相关实验操作,其对应的原代样本来源及成品细胞适用的实验样本形式如下:原代样本来源为健康人群外周血B淋巴细胞,经EBV转化(转化过程中加入环孢mei素A抑制T淋巴细胞,提升转化效率)后形成成品细胞系,完整保留人B淋巴细胞相关生物学特性;成品细胞可直接作为实验样本,用于体外培养、药物处理、分子检测、免疫实验等,适配的实验样本形式包括细胞悬液、细胞裂解液、细胞爬片等,可满足EBV感染机制、免疫功能、药物筛选等不同实验检测需求。
备注:(具体样本处理方法请参考产品说明书)
储存与注意事项
(一)储存条件
1. 复苏状态细胞:收到细胞后,立即置于37℃、5%CO₂恒温培养箱中培养,24小时内完成换液,短期储存(1-7天)可维持该培养条件,避免频繁移动培养瓶;2. 冻存状态细胞:采用液氮(-196℃)长期储存,冻存液配方为30%基础培养基+60%胎牛血清+10%DMSO,分装至冻存管后经程序降温(4℃→-20℃→-80℃→液氮)处理,避免反复冻融;3. 未开封配套试剂(如冻存液、复苏辅助试剂):2-8℃冷藏避光保存,有效期内使用,严禁冷冻。
(二)注意事项
1. 本产品仅供科研使用,不可用于人类或动物临床诊断、治疗,非药用、非食用,操作需在BSL-2生物安全实验室进行,严格遵循无菌操作规范及血液制品处理预防措施;2. 细胞培养过程中,实验器材需彻di灭菌,移液器吸头一次性使用,避免交叉污染,不可擅自更换培养基体系或血清比例,定期观察细胞状态,及时换液、传代,确保细胞生物学特性稳定;3. 收到细胞后需立即检查,若出现培养瓶破损、漏液、培养液浑浊或细胞活力异常,及时与厂家联系反馈;4. 细胞复苏时需快速解冻(37℃水浴5-10分钟),避免DMSO损伤细胞,复苏后及时离心洗涤,培养过夜后检查细胞状态;5. 部分细胞系(如B95-8衍生系)可能携带松鼠猴逆转录病毒(SMRV-B95-8),操作时需加强防护,废弃细胞及培养废液按生物安全规范妥善处理;6. 定期对细胞进行鉴定,包括EBV感染状态、细胞纯度及污染情况,防止细胞变异或污染;7. 冻存细胞复苏后建议尽快使用,未使用的细胞需按规范冻存,避免反复冻融影响细胞活性及生物学特性稳定性。
订购信息
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以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。