SV-40转化肺成纤维细胞试剂盒
SV-40转化肺成纤维细胞试剂盒（SV-40 Transformed Lung Fibroblast Cell Kit），是基于酶联免疫吸附法（ELISA）原理研发的体外诊断/科研检测试剂盒，可特异性检测相关细胞培养样本中肺成纤维细胞标志物、纤维化相关因子、增殖相关蛋白及信号通路相关分子的含量，也可用于该细胞培养过程中增殖活性监测、纤维化程度评估及药物作用效果检测，经特异性验证、灵敏度测试及重复性实验确认，无交叉反应，检测结果准确可靠，无试剂降解、杂菌污染等问题。该细胞株是通过猿猴病毒40（SV-40）大T抗原慢病毒转化原代肺成纤维细胞获得的永生化细胞株，保留肺成纤维细胞的典型特性，同时具备无限传代能力，核心特性是表达肺成纤维细胞特异性标志物（如波形蛋白Vimentin、α-平滑肌肌动蛋白α-SMA），可分泌纤维化相关因子，参与肺组织修复、纤维化进程调控，广泛应用于肺纤维化发病机制研究、呼吸系统疾病研究、抗纤维化药物筛选等领域，是评估肺成纤维细胞功能、纤维化程度及药物干预效果的重要研究模型，可用于验证抗纤维化药物对成纤维细胞增殖的抑制作用研究。本试剂盒核心特征是特异性强、操作便捷、检测快速，可精准定量相关指标含量，广泛应用于呼吸学科研、免疫学科研、药物研发、细胞生物学实验等领域，是临床、科研领域的核心肺成纤维细胞相关检测工具。
检测原理
本试剂盒的核心检测原理，基于酶联免疫吸附法（ELISA），聚焦相关细胞检测指标（肺成纤维细胞标志物、纤维化因子、增殖蛋白、信号通路分子等）的抗原抗体特异性结合特性，结合肺成纤维细胞功能检测的精准需求设计：试剂盒预先将目标检测指标（如Vimentin、α-SMA、纤维化相关因子）特异性抗体包被于酶标板上，加入待检测样本（相关细胞培养上清、细胞裂解液等）后，样本中的目标指标会与酶标板上的抗体特异性结合，形成抗原-抗体复合物；洗涤去除未结合的杂蛋白、肺成纤维细胞碎片、无关细胞因子及其他肺组织相关蛋白后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗，与复合物特异性结合，形成“包被抗体-目标指标-酶标二抗"的三明治结构；再加入底物液（TMB），HRP催化底物发生显色反应，显色强度与样本中目标指标的含量呈正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），对照标准曲线即可计算出样本中目标指标的具体含量。检测流程规范：样本采集后需及时处理（相关细胞培养上清离心分离、细胞裂解液制备），按照试剂盒说明书稀释样本；酶标板平衡至室温后，依次加入标准品、样本及空白对照，37℃孵育30分钟；洗涤3-5次后加入酶标二抗，37℃孵育20分钟；再次洗涤后加入底物液，37℃避光孵育15分钟；加入终止液终止反应，10分钟内用酶标仪测定OD值，计算检测结果。
产品特点
本产品针对相关细胞指标检测需求优化制备，核心特点如下：
1. 特异性强：采用高特异性目标指标（肺成纤维细胞标志物Vimentin、α-SMA、纤维化因子等）单克隆抗体，可特异性结合样本中的目标分子，不与正常原代肺成纤维细胞杂蛋白、其他细胞系蛋白及无关因子发生交叉反应，检测特异性＞99%，确保检测结果精准，有效规避肺成纤维细胞相关检测中的干扰因素，同时可有效区分肺成纤维细胞特异性标志物的假阳性与真实表达水平；
2. 质控严格：每批次试剂盒均通过灵敏度、重复性、特异性及稳定性检测，附完整QC报告，确保批内变异系数（CV）＜8%、批间变异系数（CV）＜10%，检测灵敏度可达0.1ng/mL，符合科研标准，可精准监测相关细胞培养过程中相关指标的微量变化，助力药物干预效果及肺纤维化调控效果评估；
3. 操作便捷：试剂盒含全套检测试剂（包被酶标板、标准品、酶标二抗、底物液、终止液、洗涤液等），无需额外配制核心试剂，步骤简单，全程可在2.5小时内完成，适配常规细胞生物学实验室操作，新手易上手；
4. 样本兼容广：可适配相关细胞培养上清、细胞裂解液、细胞接种后动物血清/肺组织匀浆等核心样本类型，样本用量少（仅需50μL/孔），无需复杂预处理，仅需简单离心、稀释即可检测，适配肺成纤维细胞培养、药物筛选、肺纤维化机制研究等多场景样本；
5. 适配场景广：可用于相关细胞增殖活性监测、纤维化程度评估、肺成纤维细胞标志物及信号通路相关分子表达检测，肺纤维化发病机制、呼吸系统疾病发病机制研究，抗纤维化药物、呼吸系统药物的筛选与效果评估，以及呼吸学科研、免疫学科研、药物研发实验室的常规检测。
适用样本类型
本试剂盒适配相关细胞样本的体外检测与科研实验，适用样本类型明确：相关细胞培养上清样本（对数期细胞培养上清，离心去除细胞碎片）、细胞裂解液样本（无菌收集细胞后裂解，离心取上清）、细胞接种后动物血清样本（静脉采血，离心分离，避免溶血）、肺组织匀浆样本（肺组织破碎后离心取上清）；实验场景涵盖相关细胞增殖、纤维化程度监测，肺成纤维细胞标志物及信号通路相关分子表达检测，肺纤维化发病机制、呼吸系统疾病发病机制研究，相关药物筛选与效果评估，以及相关实验室的常规检测。推荐检测体系：使用试剂盒配套酶标板，酶标仪（波长450nm），按照说明书步骤操作；样本稀释比例为1:10（细胞裂解液、肺组织匀浆可根据浓度适当调整），标准品浓度梯度为0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL，参考区间为0.2~1.3ng/mL（具体以说明书为准）。（具体样本处理方法请参考产品说明书，该细胞为贴壁细胞，培养需遵循贴壁细胞培养规范，采用成纤维细胞专用培养基，接种密度不低于50万个/mL，复苏后需给予一定恢复期，定期观察细胞形态、增殖状态及纤维化相关表型，避免密度过低导致不增殖，维持细胞贴壁状态避免脱落影响检测结果）
储存与注意事项
1. 试剂盒需全程2-8℃避光冷藏储存，严禁-20℃冷冻或常温放置，避免温度波动导致试剂降解、抗体活性丧失；
2. 标准品、酶标二抗等试剂开封后，密封冷藏保存，1个月内用完，目标指标标准品避免反复冻融，防止其蛋白结构破坏，底物液需避光保存；
3. 样本采集后及时处理，相关细胞培养上清、细胞裂解液冷藏24小时内完成检测，动物血清、肺组织匀浆冷藏或-20℃短期保存，48小时内完成检测，避免样本变质、目标指标降解，细胞样本需新鲜采集，避免细胞活力下降、纤维化表型异常影响检测结果；
4. 操作时严格遵循无菌规范，佩戴防护用品，避免试剂、样本接触皮肤黏膜；检测过程中控制孵育温度与时间，洗涤充分，避免未结合试剂残留导致结果偏差；
5. 底物液具有潜在刺激性，终止液为酸性溶液，操作时需谨慎，避免接触衣物与皮肤，检测完成后按生物安全规范处理废弃试剂与酶标板；
6. 相关细胞样本需无菌采集与处理，细胞裂解液需充分裂解细胞，离心去除细胞碎片及杂质后再进行检测，避免杂质干扰检测结果；培养上清需在细胞对数期采集，避免细胞凋亡释放的蛋白酶导致目标指标降解，同时避免培养体系中血清浓度过高影响检测准确性，药物干预实验中需避免药物本身干扰检测结果，纤维化诱导实验中需注意样本采集时机。
订购信息
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以上信息仅供参考，具体请已产品说明书为准。
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