鹌鹑纤维肉瘤细胞
鹌鹑纤维肉瘤细胞（Quail Fibrosarcoma Cell Kit），是基于酶联免疫吸附法（ELISA）原理研发的科研专用检测试剂盒，可特异性检测相关细胞培养样本中核心标志物、增殖凋亡相关蛋白、信号通路分子及病毒感染相关因子的含量，也可用于该细胞培养过程中增殖活性监测、肿瘤特性鉴定、药物干预效果评估及病毒敏感性检测，经特异性验证、灵敏度测试及重复性实验确认，无交叉反应，检测结果准确可靠，无试剂降解、杂菌污染等问题。该细胞以经典QT6细胞系为代表，由甲基胆蒽诱导的日本鹌鹑纤维肉瘤衍生，呈贴壁梭形生长，具有致瘤性，对禽肉瘤病毒、马立克氏病病毒等多种病毒敏感，核心免疫表型为波形蛋白（Vimentin）强阳性，结蛋白（Desmin）、S-100等阴性，广泛应用于禽类肿瘤发病机制、病毒学研究、抗肿瘤及抗病du药物筛选等领域，是评估该细胞功能、肿瘤特性及药物/疫苗干预效果的重要研究模型，可用于验证抗肿瘤药物对肿瘤细胞增殖的抑制作用及疫苗免疫原性相关研究。本试剂盒核心特征是特异性强、操作便捷、检测快速，可精准定量相关指标含量，广泛应用于禽类肿瘤科研、细胞生物学实验、药物研发及疫苗候选物评估等领域，是科研领域的核心相关检测工具。
检测原理
本试剂盒的核心检测原理，基于酶联免疫吸附法（ELISA），聚焦相关细胞检测指标（核心标志物、增殖凋亡蛋白、信号通路分子、病毒感染相关因子等）的抗原抗体特异性结合特性，结合该细胞功能检测的精准需求设计：试剂盒预先将目标检测指标（如Vimentin、Ki-67、PDGFR-β、病毒囊膜蛋白等）特异性抗体包被于酶标板上，加入待检测样本（相关细胞培养上清、细胞裂解液等）后，样本中的目标指标会与酶标板上的抗体特异性结合，形成抗原-抗体复合物；洗涤去除未结合的杂蛋白、细胞碎片、无关细胞因子及其他禽类组织相关蛋白后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗，与复合物特异性结合，形成“包被抗体-目标指标-酶标二抗"的三明治结构；再加入底物液（TMB），HRP催化底物发生显色反应，显色强度与样本中目标指标的含量呈正相关，通过酶标仪在450nm主波长（参比波长630nm）下测定吸光度（OD值），对照标准曲线即可计算出样本中目标指标的具体含量。检测流程规范：样本采集后需及时处理（相关细胞培养上清离心分离、细胞裂解液制备），按照试剂盒说明书稀释样本；酶标板平衡至室温后，依次加入标准品、样本及空白对照，37℃孵育30分钟；洗涤5次后加入酶标二抗，37℃孵育20分钟；再次洗涤5次后加入底物液，37℃避光孵育15分钟；加入终止液终止反应，10分钟内用酶标仪测定OD值，计算检测结果，全程约2.5小时。
产品特点
本产品针对相关细胞指标检测需求优化制备，核心特点如下：
1. 特异性优异：采用针对禽类Vimentin、PDGFR-β等靶点的高特异性单克隆抗体，与鹌鹑正常成纤维细胞、其他禽类肿瘤细胞系的杂蛋白无交叉反应，检测特异性＞99%，确保检测结果精准，有效规避相关检测中的干扰因素，同时可有效区分肿瘤特异性标志物的假阳性与真实表达水平；
2. 质控严格：每批次试剂盒均通过灵敏度、重复性、特异性及稳定性检测，附完整QC报告，确保批内变异系数（CV）＜8%、批间变异系数（CV）＜10%，检测灵敏度可达0.08ng/mL，符合科研标准，可精准监测相关细胞培养过程中相关指标的微量变化，助力药物/疫苗干预效果及肿瘤特性评估；
3. 操作便捷：试剂盒含全套预配试剂（包被酶标板、标准品、酶标二抗、底物液、终止液、浓缩洗涤液等），无需额外配制核心试剂，步骤简化，全程可在2.5小时内完成，适配常规细胞生物学实验室操作，新手易上手；
4. 样本兼容广：可适配相关细胞培养上清、细胞裂解液、荷瘤鹌鹑血清/肿瘤组织匀浆等核心样本类型，样本用量少（仅需50μL/孔），无需复杂预处理，仅需简单离心、稀释即可检测，适配细胞培养、病毒培养、药物筛选、肿瘤学研究等多场景样本；
5. 适配场景广：可用于相关细胞增殖活性监测、肿瘤特性鉴定、信号通路（PDGFR-β）研究、抗肿瘤药物筛选、病毒感染效率评估及疫苗研发效果检测，适配禽类肿瘤学、病毒学、药物研发等多领域科研需求。
适用样本类型
本试剂盒适配相关细胞样本的体外科研检测，适用样本类型明确及处理要求如下：相关细胞培养上清样本（对数期细胞上清，12000rpm离心5分钟，去除细胞碎片，适用于分泌型因子、病毒相关指标检测）；细胞裂解液样本（无菌收集细胞，用RIPA裂解液（含蛋白酶抑制剂）裂解，离心取上清，适用于细胞内标志物、信号通路分子检测）；荷瘤鹌鹑血清样本（静脉采血，室温静置后离心，避免溶血，4℃短期保存，适用于体内肿瘤负荷、药物代谢相关检测）；肿瘤组织匀浆样本（取新鲜肿瘤组织，研磨后用PBS匀浆，离心取上清，适用于体内肿瘤标志物表达分析）。推荐检测体系：使用试剂盒配套酶标板，酶标仪需具备450nm/630nm双波长功能；样本稀释比例为培养上清1:5、细胞裂解液1:10、组织匀浆1:8（可根据实际浓度调整），标准品浓度梯度为0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL，参考区间以说明书为准。（具体样本处理方法请参考产品说明书，该细胞为贴壁梭形细胞，培养需遵循贴壁细胞培养规范，推荐使用Ham's F12K（含2mM L-谷an酰胺、1.5g/L碳suan氢钠）添加10%胰蛋白胨磷酸盐肉汤、5%小牛血清，或Ham's F10添加10%胎牛血清；培养条件为37℃、5%CO₂，传代比例1:2~1:4，75%汇合度时传代，可通过机械吹打或低浓度yi酶（含PVP）消化，避免细胞聚团；冻存液建议为95%培养液+5%DMSO，液氮保存，传代代次控制在低代次以维持肿瘤特性与病毒敏感性）
储存与注意事项
1. 试剂盒需全程2-8℃避光冷藏储存，严禁-20℃冷冻或常温放置，避免温度波动导致试剂降解、抗体活性丧失；
2. 标准品、酶标二抗等试剂开封后，密封冷藏保存，1个月内用完，目标指标标准品避免反复冻融，防止其蛋白结构破坏，底物液需避光保存；
3. 样本采集后及时处理，相关细胞培养上清、细胞裂解液冷藏24小时内完成检测，禽类血清、肿瘤组织匀浆冷藏或-20℃短期保存，48小时内完成检测，避免样本变质、目标指标降解，细胞样本需新鲜采集，避免细胞活力下降、贴壁能力异常及病毒敏感性降低影响检测结果；
4. 操作时严格遵循无菌规范，佩戴防护用品，避免试剂、样本接触皮肤黏膜；检测过程中控制孵育温度与时间，洗涤充分，避免未结合试剂残留导致结果偏差；
5. 底物液具有潜在刺激性，终止液为酸性溶液，操作时需谨慎，避免接触衣物与皮肤，检测完成后按生物安全规范处理废弃试剂与酶标板；
6. 相关细胞样本需无菌采集与处理，细胞裂解液需充分裂解细胞，离心去除细胞碎片及杂质后再进行检测，避免杂质干扰检测结果；培养上清需在细胞对数期采集，避免细胞凋亡释放的蛋白酶导致目标指标降解，同时避免培养体系中血清浓度过高影响检测准确性，药物干预实验及病毒感染实验中需设置空白对照与阴性对照，排除药物、病毒本身对显色反应的干扰，病毒感染检测中需注意样本采集时机以捕捉病毒增殖峰值。
订购信息
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以上信息仅供参考，具体请已产品说明书为准。
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