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Product Center人软骨细胞
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应用领域 | 生物产业 |
本公司提供人软骨细胞产品订购。上海乾思生化试剂网主营ATCC细胞、ATCC细胞株、ATCC细胞系,冻存复苏细胞皆有,所供细胞成活率高。如果您需要订购细胞产品,请与我们,我们将在12小时内给您回复。
细胞复苏操作步骤:
1.将冷冻管迅速由液氮转入到37℃水浴中,冷冻管的顶部保持在水面以上以避免任何污染,不定时搅拌加速解冻;
2.当细胞*解冻后,用含70%乙醇的纱布擦拭冷冻管消毒;
3.将解冻后细胞转移到含4℃预平衡培养液的试管中;
4.细胞悬液在4℃下200磄离心10分钟;
5.弃上清,将细胞重新悬浮在新鲜培养液中;
6.将细胞转移到细胞培养瓶,CO2孵箱中培养;
7.是用倒置显微镜检查细胞存活率以及细胞密度,如果细胞密度过高,用培养液稀释至适宜浓度。
培养条件:
*培养基:DMEM高糖培养基90%;胎牛血清10%。
培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
传代方法:
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。 (一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整 个瓶消毒后放到超菌 台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下 10ml培养液在瓶内继 续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中, 倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又 将培养瓶倒转大约30 秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分 散,轻敲几下培养 培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml*培养基,吸出,分到新的培养瓶中。1:3~1:6 传代;2~3天1次。
注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细 胞不适应而造成生长不好。
冻存方法:冻存液:基础培养基 +5%DMSO+20%FBS
储存:液氮储存