大鼠角膜基质细胞
大鼠角膜基质细胞在维持角膜的透明性、结构完整性及正常生理功能方面发挥着极为关键的作用。这些细胞主要位于角膜基质层,占角膜厚度的约 90% 。从细胞形态来看,它们呈现出不规则的星状或纺锤状,具有多个细胞突起,借此与周围细胞及细胞外基质相互连接。
角膜基质细胞的特性鲜明。在正常状态下,其代谢活动相对稳定,主要负责合成和维持角膜基质中的细胞外基质成分,如胶原蛋白、蛋白多糖等。其中,规则排列的胶原蛋白纤维是保证角膜透明性的关键结构基础,而蛋白多糖则对维持角膜水分平衡及机械强度至关重要。此外,当角膜受到损伤或处于病理状态时,角膜基质细胞能够迅速感知并发生表型转化。它们会从相对静止的状态转变为活跃的成纤维细胞样表型,增殖能力增强,同时合成和分泌更多的细胞外基质成分,启动角膜的修复过程。
获取该细胞一般通过组织块培养法或酶消化法。组织块培养法是将分离出的大鼠角膜基质组zhi剪成小块,接种于培养瓶中,细胞会从组织块边缘逐渐迁移生长出来。酶消化法则是利用胰蛋/白酶、胶原酶等将角膜基质组织消化,使细胞分离,经离心、洗涤后进行培养。培养过程中,需使用含有多种营养成分的培养基,如添加胎牛血清、胰岛素、表皮生长因子等,为细胞生长提供适宜环境。培养环境要求严格控制温度在 37℃,湿度饱和,气体环境为 5% 二氧化碳和 95% 空气。
在角膜生理功能方面,角膜基质细胞通过持续更新和维护细胞外基质,保持角膜的透明性和机械强度,确保光线能够顺利透过角膜进入眼内,为清晰的视觉奠定基础。在角膜损伤修复中,转化后的角膜基质细胞能够增殖并迁移至损伤部位,合成新的细胞外基质,填补损伤区域,促进角膜伤口的愈合。然而,若修复过程异常,可能导致角膜瘢痕形成,影响角膜的透明性和视力。