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Technical articles如今检测ELISA有许多途径,我们可以根据自己的偏好进行选择。一般ELISA检测的是酶促反应的可溶性产物,抗体上结合有相应的酶(例如通常使用的辣根过氧化物酶HRP),而反应体系中添加有相应的底物(如3,3-二氨基联苯胺DAB)。这种酶促反应生成具有特征性的颜色,可以通过分光光度计进行检测,碱性磷酸酶AP也是一种常用酶。酶可以结合在一抗上,也可以结合在二抗上,还可以使用链霉亲和素标记的酶与亲和素标记的一抗结合。此外ELISA的结果检测还包括放射性检测、荧光检测、化学发光或显色法检测等。
人类成纤维细胞(多种种属)实验科研认可品牌
白介素16ELISA试剂盒,本应用试剂盒已完成多中心临床验证,并通过国家食药监总局的认证。我司通过建立覆盖欧美的采购中心,与欧美1000多个品牌建立了正式的代理与合作,涵盖所有的生物试剂门类,特别是二三线高质量品牌产品,具有压倒性地优势。产品领域:分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域。主营产品:流式抗体、ELISA试剂盒、标准品和对照品、生化试剂、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备。
● 试剂盒操作步骤如下: ● 1.用TBS或PBS制备蛋白样品的稀释液。稀释度要取决于样品中存在的抗原浓度。由于抗原浓度通常未知,因此有必要检测宽范围的稀释度。 2.制备硝酸纤维素膜,用铅笔标上每个待测一抗/二抗的浓度。所需转印膜的数量取决于待筛查的一抗和/或二抗有多少种不同的稀释浓度。通常来说,一抗要检测一到两个稀释度,而二抗要检测两到三个稀释度。 3.将硝酸纤维素膜放在滤纸上,将抗原稀释液点在膜上。每个点的体积越少越好(1-5μl),以保证点尽可能地小。如果需要使用5μl以上的样品,在点完一次后,干燥2-5分钟,再点一次。让膜干燥10-15分钟,或直至无可见水分。 4.用封闭液封闭膜上的非特异性位点,室温震荡孵育1h。 5.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释一抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。 6.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。 7.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释二抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。 8.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。 9.准备底物工作液。白介素1ELISA试剂盒厂家制备足够体积的工作液,以确保印迹点*湿润,且印迹点在孵育过程中不会干。 10.将膜放在底物工作液中孵育5分钟。 11.将膜取出,放在塑料布或其它防护膜上。 12.蛋白一侧朝上,将印迹贴到胶片上,曝光30-60秒。为获得*结果,曝光时间可能不同。如果*次曝光不够,再试试2-5分钟。 13.在一张优化好的印迹膜上,底物产生的信号可能会持续6-24小时,这取决于具体的产品。
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编辑:小檀20181010