C57小鼠黑色素瘤瘤株
C57小鼠黑色素瘤瘤株核心产品为从C57BL/6小鼠黑色素瘤组织中分离、永生化构建的稳定细胞株,核心提供B16、B16-F10两种常用亚型(B16为基础亚型,B16-F10侵袭转移能力更强),可提供不同传代次数的细胞系,配套提供细胞培养说明书、细胞冻存液、复苏液及质量检测报告(含细胞纯度、黑色素标志物鉴定、支原体检测、相关基因表达检测等),同时提供细胞培养技术支持及定制化实验服务。该瘤株采用胰dan白酶消化、密度梯度离心等成熟分离技术,从C57BL/6小鼠黑色素瘤组织中去除正常黑色素细胞、成纤维细胞等杂细胞,通过黑色素瘤特异性标志物(如MAGE-A3、MART1、PAX3、酪an酸酶)鉴定,确保细胞纯度≥98%,无支原体、细菌、真菌污染,细胞活性≥90%。该瘤株适配常规贴壁细胞培养条件,可稳定传代,生物学特性稳定,保留其恶性增殖、黑色素分泌及侵袭转移潜能,广泛应用于黑色素瘤发病机制研究、肿瘤侵袭转移实验、靶向药物筛选、免yi治疗相关实验及基因功能验证等科研场景,依托C57BL/6小鼠补体活性高、干扰素产量较高、易诱发免疫耐受性的遗传特性,适配肿瘤学、免疫学相关研究,为肿瘤学、分子生物学、免疫学等相关领域的科研探索、药物研发提供核心细胞模型,适配科研院所、生物医药企业、高校实验室及各级医院肿瘤科科研部门。
分离与培养原理
该瘤株的分离与培养核心基于肿瘤组织消化分离及永生化技术,结合C57小鼠黑色素瘤细胞贴壁生长、恶性增殖的生物学特性,实现细胞的精准分离与体外稳定培养,具体核心步骤分为分离和培养两部分:一是细胞分离原理,选取接种黑色素瘤细胞后形成肿瘤的健康C57BL/6小鼠,无菌操作下取出肿瘤组织,碎至1mm³大小的组织块,加入0.25%胰dan白酶-EDTA消化液(B16-F10可选用不含EDTA的yi酶),37℃水浴消化20-30分钟,期间每5-10分钟摇动一次,消化完成后加入含胎牛血清的培养基终止消化,用PBS漂洗2-3次,800r/min离心5分钟弃去上清液,通过密度梯度离心去除杂细胞,利用黑色素瘤特异性标志物筛选,获得高纯度该瘤株;二是细胞培养原理,将分离获得的该瘤株接种于培养瓶中,使用含10%胎牛血清的DMEM培养基,添加青mei素、链mei素双抗,置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养,培养基可维持细胞的恶性增殖活力,同时保留其黑色素分泌、侵袭转移及相关基因表达特性,定期更换培养基(每2-3天一次),待细胞融合度达80%-90%时进行传代,确保细胞正常生长,避免细胞老化或凋亡。此外,所有分离培养的该瘤株均需经过细胞活性检测、纯度鉴定、黑色素标志物检测及污染检测,确保细胞的稳定性和可靠性,为后续科研实验提供优质细胞模型,同时可通过优化培养体系,模拟体内黑色素瘤微环境,提升细胞体外培养的稳定性。
产品特点
该瘤株以“纯度高、活性强、特征典型、适配性广"为核心,贴合C57小鼠遗传背景及黑色素瘤相关研究的实际科研需求,核心特点突出,匹配科研实验对肿瘤细胞模型的核心诉求。一是遗传背景均一,源自近交系C57BL/6小鼠,基因纯合度高,个体差异小,可显著提升实验数据的可重复性与可比性,同时继承该品系补体活性高、干扰素产量较高、易诱发免疫耐受性的特性,适配免yi治疗相关研究;二是细胞纯度高、无污染,细胞纯度≥98%,经黑色素瘤特异性标志物鉴定及严格污染检测,无支原体、细菌、真菌及杂细胞污染,确保实验结果的准确性;三是核心特征典型,不同亚型各具特色,B16瘤株恶性度适中,适用于基础机制研究,B16-F10瘤株侵袭转移能力强,适用于转移相关实验,均具备黑色素分泌能力,可通过黑色素标志物快速鉴定,同时存在蛋白4.1B表达缺失等典型分子特征,可精准模拟临床黑色素瘤的病理状态;四是生物学特性稳定,细胞生长状态良好,贴壁性强、增殖迅速,可稳定传代30代以上,传代过程中恶性表型、黑色素分泌及侵袭转移特性不丢失,符合科研实验对数据可重复性的核心要求;五是适配性强,可适配体外常规贴壁细胞培养、MTT增殖实验、Transwell侵袭/迁移实验、平板细胞克隆形成实验、Western blotting检测、免疫荧光染色、基因转染、药物敏感性实验等多种实验场景,同时可用于C57BL/6小鼠体内移植实验,构建皮下移植瘤或肺转移模型,助力体内外协同研究;六是操作便捷,提供完整的细胞复苏、培养、冻存说明书,细胞复苏成活率高(≥90%),无需复杂实验设备,常规贴壁细胞培养条件即可满足生长需求,适配各类实验室操作,同时提供黑色素标志物检测、基因表达验证等专属技术指导。
适用实验场景
该瘤株专为C57小鼠背景黑色素瘤相关科研实验设计,适配多种体外及体内实验场景,核心应用包括:一是黑色素瘤发病机制研究,利用该瘤株探究黑色素瘤发生发展的分子机制,分析蛋白4.1家族、MAGE-A3、MART1等相关基因及信号通路的作用,明确黑色素瘤恶性增殖、侵袭转移的调控机制;二是肿瘤侵袭转移研究,利用B16-F10亚型的高转移特性,开展Transwell、尾静脉移植肺转移等实验,探究黑色素瘤转移的分子路径,同时可用于评估高强度聚焦超声(HIFU)等治疗手段对肿瘤转移的抑制效果;三是药物筛选与药效评估,将该瘤株用于黑色素瘤靶向药物、hua疗药物、免疫调节剂的筛选,评估药物对细胞增殖、凋亡、侵袭的抑制效果,同时可用于评估药物对肿瘤细胞黑色素分泌的影响,为药物研发提供可靠的筛选模型;四是免yi治疗相关研究,依托C57BL/6小鼠的免疫特性,将该瘤株用于免疫检查点抑制剂(如PD-1/PD-L1抑制剂)、CAR-T细胞治疗、CSC-DC疫苗等相关实验,评估免yi治疗对黑色素瘤细胞的杀伤效果,探究IL-12等细胞因子对肿瘤免疫微环境的调控作用;五是基因功能研究,通过该瘤株开展基因过表达、沉默实验,探究相关基因(如蛋白4.1B、IL-12)对黑色素瘤细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,明确其抑癌或促癌作用;六是分子机制验证实验,可用于Western blotting、Real-time PCR、流式细胞术等实验,验证黑色素瘤相关基因及信号通路的调控机制,为相关研究提供分子层面的数据支撑。该瘤株适配科研院所、生物医药企业、高校实验室及各级医院肿瘤科科研部门,助力相关科研实验的顺利开展。
备注:(具体细胞分离、培养及实验操作方法请参考产品说明书)
储存与注意事项
储存方面,该瘤株冻存状态下需置于-80℃超低温冰箱或液氮中保存,有效期为12个月,冻存时需使用含5-10%DMSO的配套冻存液,采用梯度降温法冻存(-1~-2℃/min降温至-25℃以下,再以-5~-10℃/min降温至-100℃后浸入液氮),避免细胞损伤;复苏时需快速解冻(37℃水浴1-2分钟),解冻后立即用70%酒精消毒冻存管,避免进水污染,复苏后需立即接种至培养瓶,加入预热的专用培养基,置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养,复苏后24小时内避免更换培养基,确保细胞适应环境、稳定贴壁;常规培养状态下,细胞需置于37℃、5% CO₂培养箱中,使用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养,定期更换培养基(每2-3天一次),待细胞融合度达80%-90%时传代,B16传代可选用含EDTA的yi酶,B16-F10建议选用不含EDTA的yi酶,避免细胞损伤,传代比例建议为1:3-1:5,避免细胞过度融合导致老化。注意事项包括:产品仅供科研使用,不用于临床治疗诊断;细胞复苏时需快速解冻,避免反复冻融,解冻后及时接种,防止细胞活力下降,冻存管取出时需注意防护,避免冻伤;培养过程中需严格遵循无菌操作原则,禁止共用培养耗材,避免细胞污染,若发生污染切勿进行半量换液,无菌操作是细胞培养成功的关键;细胞传代时需控制消化时间(3-5分钟),避免过度消化导致细胞贴壁能力下降,传代时轻柔吹打,避免剧烈震荡损伤细胞;检测过程中(如Western blotting、流式细胞术),需严格遵循实验操作规范,确保黑色素标志物及相关分子检测结果准确;过期细胞及污染细胞严禁使用,详细安全信息请参照产品SDS文件;运输过程中需采用干冰运输,避免高温、剧烈震荡,确保细胞活力,运输后需及时复苏或转移至对应储存环境。
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以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。