C3H/An小鼠结缔组织细胞（L929-TK-）
C3H/An小鼠结缔组织细胞（L929-TK-）核心产品为从C3H/An小鼠结缔组织中分离、永生化并通过基因编辑敲除TK基因构建的稳定细胞株，可提供不同传代次数的细胞系，配套提供细胞培养说明书、细胞冻存液、复苏液及质量检测报告（含细胞纯度、TK基因缺失验证、支原体检测、成纤维细胞标志物鉴定等），同时提供细胞培养技术支持及定制化实验服务。该细胞采用yi蛋白酶消化、差速贴壁等成熟分离技术，从C3H/An小鼠结缔组织中去除杂细胞，通过成纤维细胞特异性标志物（如波形蛋白Vimentin、α-平滑肌肌动蛋白α-SMA）及TK基因缺失验证，确保细胞纯度≥98%，无支原体、细菌、真菌污染，细胞活性≥90%。该细胞适配常规贴壁细胞培养条件，可稳定传代，生物学特性稳定，保留其贴壁生长、增殖活跃及TK基因缺陷的核心特征，广泛应用于肿瘤自sha基因治疗研究、TK相关药物筛选、细胞增殖与凋亡调控研究及病毒感染实验等科研场景，依托C3H/An小鼠的遗传特性，同时适配肿瘤学、生理学相关研究，为肿瘤学、分子生物学、细胞生物学等相关领域的科研探索、药物研发提供核心细胞模型，适配科研院所、生物医药企业、高校实验室及各级医院科研部门。
分离与培养原理
该细胞的分离与培养核心基于结缔组织消化分离、永生化及基因编辑技术，结合C3H/An小鼠结缔组织细胞贴壁生长的生物学特性及TK基因缺陷特征，实现细胞的精准分离与体外稳定培养，具体核心步骤分为分离、基因编辑和培养三部分：一是细胞分离原理，选取健康C3H/An小鼠，无菌操作下取出结缔组织，去除血管、神经等杂组织，碎至1mm³大小的组织块，加入0.25%yi蛋白酶-EDTA消化液，37℃水浴消化30-40分钟，期间每5-10分钟摇动一次，消化完成后加入含胎牛血清的培养基终止消化，用Hanks液漂洗2-3次，800r/min离心5分钟弃去上清液，通过差速贴壁法去除杂细胞，获得高纯度原代结缔组织细胞；二是基因编辑原理，采用CRISPR-Cas9等成熟基因编辑技术，定向敲除原代细胞中的TK基因，经抗性筛选、Western Blot、Real-time PCR等方法验证，确保TK基因稳定缺失，获得L929-TK-细胞株，TK基因主要参与细胞增殖和分化过程，其缺失可使细胞对特定药物产生特异性敏感性；三是细胞培养原理，将构建获得的该细胞接种于培养瓶中，使用含10%胎牛血清的DMEM培养基，添加青mei素、链mei素双抗，置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养，培养基可维持细胞的正常增殖活力，同时保留其贴壁生长及TK基因缺陷特性，定期更换培养基（每2-3天一次），待细胞融合度达80%-90%时进行传代，确保细胞正常生长，避免细胞老化或凋亡。此外，所有分离培养的该细胞均需经过细胞活性检测、纯度鉴定、TK基因缺失验证及污染检测，确保细胞的稳定性和可靠性，为后续科研实验提供优质细胞模型，同时可通过优化培养体系，模拟体内结缔组织微环境，提升细胞体外培养的稳定性。
产品特点
该细胞以“纯度高、活性强、特征明确、适配性广"为核心，贴合TK基因相关研究及C3H/An小鼠遗传背景相关科研需求，核心特点突出，匹配科研实验对细胞模型的核心诉求。一是遗传背景均一，源自近交系C3H/An小鼠，基因纯合度高，个体差异小，可显著提升实验数据的可重复性与可比性，同时继承该品系补体活性高、对狂犬病毒敏感等特性，适配多领域研究；二是细胞纯度高、无污染，细胞纯度≥98%，经成纤维细胞特异性标志物鉴定及严格污染检测，无支原体、细菌、真菌及杂细胞污染，确保实验结果的准确性；三是核心特征明确，TK基因稳定缺失，对胸苷激酶相关药物（如GCV）具有特异性敏感性，可精准用于肿瘤自sha基因治疗及药物筛选相关实验，同时可作为TK基因功能研究的对照模型；四是生物学特性稳定，细胞生长状态良好，贴壁性强、增殖迅速，可稳定传代30代以上，传代过程中TK基因缺失特性不丢失，贴壁生长表型稳定，符合科研实验对数据可重复性的核心要求；五是适配性强，可适配体外常规贴壁细胞培养、MTT增殖实验、细胞划痕实验、Western blotting检测、免疫荧光染色、基因转染、药物敏感性实验等多种实验场景，同时可用于裸鼠体内移植实验，助力体内外协同研究，还可被TGF-β1诱导转化为肌成纤维细胞，适配纤维化相关研究；六是操作便捷，提供完整的细胞复苏、培养、冻存说明书，细胞复苏成活率高（≥90%），无需复杂实验设备，常规贴壁细胞培养条件即可满足生长需求，适配各类实验室操作，同时提供TK基因缺失验证、细胞培养等专属技术指导。 适用实验场景
该细胞专为TK基因相关、肿liu治疗及结缔组织相关科研实验设计，适配多种体外及体内实验场景，核心应用包括：一是TK基因功能研究，利用该细胞TK基因缺失的特性，探究TK基因在细胞增殖、分化及肿瘤发生中的作用，明确其作为细胞异常增殖标记物的相关功能，为基因功能研究提供支撑；二是肿瘤自sha基因治疗研究，将该细胞作为模型，探究TK基因介导的自sha基因治疗方案，评估GCV等药物对肿瘤细胞的杀伤效果，为肿瘤基因治疗技术研发提供依据；三是药物筛选与药效评估，将该细胞用于TK相关靶向药物、hua疗药物、抗炎药物及抗纤维化药物的筛选，评估药物对细胞增殖、凋亡、迁移的影响，同时可用于评估药物对细胞氧化损伤的保护作用，为药物研发提供可靠的筛选模型；四是细胞增殖与凋亡调控研究，利用该细胞探究不同因素对结缔组织细胞增殖、凋亡的调控机制，分析相关信号通路的作用，为结缔组织疾病研究提供支撑；五是病毒感染相关研究，依托C3H/An小鼠对狂犬病毒敏感的特性，将该细胞用于病毒感染机制研究及抗病du药物筛选；六是分子机制验证实验，可用于Western blotting、Real-time PCR、流式细胞术等实验，验证TK基因相关信号通路及成纤维细胞转化相关分子的调控机制，为相关研究提供分子层面的数据支撑。该细胞适配科研院所、生物医药企业、高校实验室及各级医院科研部门，助力相关科研实验的顺利开展。 备注：（具体细胞分离、培养及实验操作方法请参考产品说明书）
储存与注意事项
储存方面，该细胞冻存状态下需置于-80℃超低温冰箱或液氮中保存，有效期为12个月，冻存时需使用含5-10%DMSO的配套冻存液，采用梯度降温法冻存（-1~-2℃/min降温至-25℃以下，再以-5~-10℃/min降温至-100℃后浸入液氮），避免细胞损伤；复苏时需快速解冻（37℃水浴1-2分钟），解冻后立即用70%酒精消毒冻存管，避免进水污染，复苏后需立即接种至培养瓶，加入预热的专用培养基，置于37℃、5% CO₂、饱和湿度的培养箱中培养，复苏后24小时内避免更换培养基，确保细胞适应环境、稳定贴壁；常规培养状态下，细胞需置于37℃、5% CO₂培养箱中，使用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养，定期更换培养基（每2-3天一次），待细胞融合度达80%-90%时传代，避免细胞过度融合导致老化。注意事项包括：产品仅供科研使用，不用于临床治疗诊断；细胞复苏时需快速解冻，避免反复冻融，解冻后及时接种，防止细胞活力下降，冻存管取出时需注意防护，避免冻伤；培养过程中需严格遵循无菌操作原则，禁止共用培养耗材，避免细胞污染，若发生污染切勿进行半量换液，无菌操作是细胞培养成功的关键；细胞传代时需控制消化时间（3-5分钟），避免过度消化导致细胞贴壁能力下降，传代比例建议为1:3-1:5，确保细胞生长密度适宜；检测过程中（如Western blotting、流式细胞术），需严格遵循实验操作规范，确保TK基因缺失及相关分子检测结果准确；过期细胞及污染细胞严禁使用，详细安全信息请参照产品SDS文件；运输过程中需采用干冰运输，避免高温、剧烈震荡，确保细胞活力，运输后需及时复苏或转移至对应储存环境。
订购信息
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以上信息仅供参考，具体请已产品说明书为准。
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