大鼠X小鼠杂合脾 骨髓瘤细胞

细胞培养原理

细胞特点

• 杂合特性稳定：该细胞遗传背景清晰，形态均一（圆形、椭圆形半贴壁），兼具大鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞的核心特性，可稳定表达免疫相关蛋白，连续传代50代以上仍保持正常形态与杂合功能，无显著变异，适合长期科研实验及单克隆抗体制备；

• 培养难度适中：对培养环境要求贴合哺乳动物杂交瘤细胞标准，采用杂交瘤专用培养基+10%胎牛血清即可满足生长，37℃、5% CO₂条件下，3-4天可达70%-80%汇合度，传代操作简便，经简单培训即可上手，适配常规实验室培养；

• 适用性广：可用于单克隆抗体的研发、筛选与扩增，免疫信号通路解析，抗原识别与结合实验，免疫功能评估，同时可用于杂交瘤技术优化、免疫细胞与肿瘤细胞相互作用研究，覆盖免疫相关科研及抗体研发的核心场景；

• 易检测与调控：该细胞形态易观察，可通过显微镜快速判断细胞生长状态及形态变化，便于实时监测实验进程；同时可通过调节培养条件（如添加细胞因子、抗原刺激），调控细胞增殖、蛋白表达及免疫功能，适配不同实验需求；

• 兼容性好：该细胞可与免疫细胞共培养，能耐受常用的细胞实验操作（如转染、药物处理、冻存复苏、抗原刺激），实验重复性高，保障科研实验的稳定性和可靠性，适配多类型免疫相关实验设计及单克隆抗体制备。

适用实验场景

• 单克隆抗体制备实验：作为杂交瘤细胞核心体系，用于特异性单克隆抗体的研发、筛选、扩增及纯化，适配多种抗原对应的抗体制备，为抗体药物研发提供体外实验平台；

• 免疫相关机制实验：免疫信号通路解析、免疫细胞功能调控研究，抗原识别与结合实验，探究杂合细胞的免疫特性及调控机制，为免疫相关疾病研究提供理论支撑；

• 药物研发实验：免疫抑制剂、免疫增强剂的筛选与药效评估，抗体药物的活性检测，为免疫相关药物及抗体药物研发提供体外筛选平台；

• 细胞生物学实验：细胞增殖、凋亡机制研究，细胞融合技术优化，蛋白表达与纯化实验，细胞信号通路调控实验，适配杂交瘤细胞相关基础研究；

• 其他：抗原检测方法建立，免疫诊断试剂研发相关实验，杂交瘤技术教学实验，覆盖免疫相关科研、抗体研发及教学的核心场景。

储存与注意事项

（一）储存条件

• 冻存储存：冻存液推荐90%wan全培养基+10% DMSO，梯度降温程序为4℃ 30 min → -20℃ 1 h → -80℃ 过夜 → 转入液氮（-196℃）长期保存；短期可在-80℃存放1–3个月，避免反复冻融，防止细胞活性下降；

• 复苏后储存：细胞复苏后，需立即接种至预热的培养体系中，置于37℃、5% CO₂培养箱中培养，24小时内更换一次培养基，去除冻存液残留，确保细胞正常贴壁生长，复苏后细胞建议在1周内完成传代或实验，避免细胞活力下降；

• 培养基储存：杂交瘤专用培养基需置于2-8℃冷藏储存，避免冷冻、高温及强光直射，开封后需密封保存，添加抗菌试剂后建议在1周内使用完毕，未添加抗菌试剂的培养基可冷藏保存2-3周，若出现浑浊、沉淀等异常，禁止使用；

• 运输条件：细胞运输采用干冰低温运输（-70℃以下），运输过程中做好防震、防破损措施，运输时间不超过48小时，接收后立即检查细胞冻存管是否完好，快速转入-80℃冰箱或液氮中储存，若为复苏后运输，需维持37℃恒温运输，确保细胞活力。

（二）注意事项

• 本细胞仅用于科研，严禁用于临床、诊疗或其他非科研用途，实验过程中需严格遵循无菌操作规范，避免细胞污染及交叉污染，同时遵循科研实验伦理要求，规范处理废弃细胞及培养耗材；

• 细胞培养前需仔细阅读本说明书，严格按照操作步骤进行细胞复苏、传代、培养及冻存，避免因操作不当导致细胞损伤、活力下降或污染，尤其注意培养温度的控制（严禁低于35℃或高于39℃），适配该杂合细胞的生理特性；

• 所有培养耗材（培养瓶、离心管、移液器吸头等）需经高压灭菌处理，确保无菌无杂质；培养基使用前需恢复至室温（37℃），轻轻摇匀，避免剧烈震荡，添加抗菌试剂时需精准控制用量，防止药物对细胞产生毒性；

• 细胞复苏：将冻存管快速放入37℃水浴，轻柔摇晃至wan全融化（约1–2 min）；1000 rpm 离心5 min，弃去含DMSO的冻存液；用预热至37℃的新鲜专用培养基重悬细胞，接种至包被后的培养瓶，24 h 后更换培养基，降低DMSO对细胞的损伤；

• 细胞传代时，需待细胞生长至70%-80%汇合度时进行，细胞消化液消化时间需严格控制（通常为1-2min），显微镜下观察到细胞变圆、脱离培养瓶壁时，立即加入含血清的培养基终止消化，避免过度消化损伤细胞；

• 培养过程中需定期观察细胞形态及生长状态，若出现细胞形态异常、贴壁能力下降、培养基浑浊等情况，需及时排查是否存在污染（细菌、真菌、支原体等），污染严重时需丢弃细胞，避免扩散；

• 实验所用的DMSO、胎牛血清、专用培养基等试剂需符合细胞培养级标准，避免使用过期或质量不合格的试剂；实验结束后，废弃细胞、培养基及耗材需经灭菌处理后丢弃，避免生物污染，符合科研实验安全规范；

• 若细胞活力下降、传代困难或出现异常变异，可排查储存条件、培养环境或试剂质量，针对性优化培养方案（如更换包被液、调整培养基成分、添加生长因子），必要时重新复苏冻存细胞，确保实验顺利进行。

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